【佳學(xué)基因檢測(cè)】北京動(dòng)作性震顫、笨拙和走路狀態(tài)異?；驒z測(cè)

基因檢測(cè)病例介紹

一名23歲的上?；颊咭蛐凶呃щy來(lái)到佳學(xué)基因檢測(cè)合作門診就診。自15歲起，他便出現(xiàn)了緩慢進(jìn)展的動(dòng)作性震顫、笨拙和步態(tài)問(wèn)題。到19歲時(shí)，他已經(jīng)無(wú)法奔跑。過(guò)去一年中，他因摔倒幾次而開(kāi)始使用拐杖，目前醫(yī)生建議他使用輪椅。患者沒(méi)有其他病史。父親因事故去世，享年40歲，生前也有震顫和平衡能力差的癥狀。母親和兩個(gè)兄弟姐妹均沒(méi)有步態(tài)障礙的病史?？赡芑疾〉母赣H及未患病的家庭成員之前均未進(jìn)行過(guò)基因檢測(cè)，從而未能意識(shí)到該病會(huì)遺傳并影響多位后代。

臨床檢查顯示他有嚴(yán)重的小腦性共濟(jì)失調(diào)、肌張力低下、反射亢進(jìn)、伸肌跖反射以及明顯的構(gòu)音障礙。共濟(jì)失調(diào)評(píng)估和評(píng)分量表的得分為25/40。未發(fā)現(xiàn)自主神經(jīng)功能障礙或帕金森癥，神經(jīng)系統(tǒng)的外部檢查也正常，認(rèn)知功能未見(jiàn)明顯異常。腦部MRI結(jié)果顯示嚴(yán)重的孤立性小腦萎縮。維生素E和甲胎蛋白水平正常，眼底檢查結(jié)果也無(wú)異常。肌電圖顯示輕度軸突長(zhǎng)度依賴性神經(jīng)病變。隨后，上海三甲醫(yī)院將血液樣本送至位于北京的佳學(xué)基因?qū)嶒?yàn)室進(jìn)行小腦性共濟(jì)失調(diào)的分子診斷。

對(duì)弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)、SCA2、3、6、7和17的基因檢測(cè)結(jié)果均為陰性?；蚪獯a基因檢測(cè)在ATXN1基因中發(fā)現(xiàn)兩個(gè)擴(kuò)增的等位基因：一個(gè)61個(gè)重復(fù)的致病等位基因和一個(gè)37個(gè)重復(fù)的意義不明的等位基因（圖1.AB）。在36到38個(gè)重復(fù)之間，這個(gè)等位基因的性質(zhì)可能是正常的或不穩(wěn)定的，這取決于是否存在CAT中斷。為了評(píng)估第二個(gè)等位基因的穩(wěn)定性及其對(duì)遺傳咨詢的影響，基因解碼對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行了SfaNI酶消化。結(jié)果顯示兩個(gè)等位基因均未出現(xiàn)中斷（圖1.C）。37個(gè)CAG重復(fù)序列的較短等位基因被歸類為中間等位基因（或可變正常等位基因）。這種中間等位基因與癥狀無(wú)關(guān)，但具有較高的不穩(wěn)定性，傳遞給后代時(shí)可能會(huì)擴(kuò)增至異常范圍。

基因檢測(cè)結(jié)果解釋

脊髓小腦萎縮１型（SCA1)基因座的譜系和分子分析

(A) 家族譜系：圓圈表示女性，正方形表示男性，箭頭指向先證者。實(shí)心黑色符號(hào)表示有臨床癥狀的成員，半黑色符號(hào)表示有病史的個(gè)體，空心符號(hào)表示未患病的個(gè)體，斜線表示已故個(gè)體。標(biāo)注的縮寫含義為：CA = 當(dāng)前年齡；AAD = 死亡年齡；AAO = 發(fā)病年齡。

(B) 毛細(xì)管電泳分析：使用熒光PCR檢測(cè)患者的脊髓小腦萎縮１型（SCA1)基因位點(diǎn)，圖示結(jié)果顯示出兩個(gè)等位基因：一個(gè)為致病性不確定的37個(gè)三聯(lián)體，另一個(gè)為致病等位基因61個(gè)三聯(lián)體。

(C) TP-PCR分析：同樣的電泳圖譜結(jié)果進(jìn)一步確認(rèn)了這兩個(gè)等位基因的存在。

div (D) 序列中斷分析：在患者樣本中，230 bp的帶（37個(gè)三聯(lián)體）在酶消化后仍然存在（見(jiàn)箭頭），而未觀察到約90-130 bp的裂解產(chǎn)物。這里的“bp”表示堿基對(duì)；“Ctrl +”為陽(yáng)性對(duì)照；“Ctrl -”為陰性對(duì)照。

基因解碼基因檢測(cè)的先進(jìn)性

在本例中，缺少CAT中斷的確定提供了關(guān)鍵信息，并意外發(fā)現(xiàn)了中等大小的不穩(wěn)定等位基因。這對(duì)遺傳咨詢具有重要意義，因?yàn)樵谶@個(gè)家庭中，遺傳咨詢的復(fù)雜性相當(dāng)高。事實(shí)上，所有患兒的直系親屬，特別是他的兄弟姐妹，在未來(lái)罹患此病的風(fēng)險(xiǎn)極高，同時(shí)也可能攜帶中間等位基因，從而向后代傳遞一個(gè)等位基因，其CAG擴(kuò)增大小可能使其成為完全發(fā)病基因狀態(tài)。

本病例揭示了中間等位基因?qū)顾栊∧X萎縮１型（SCA1)臨床表型的潛在影響。已有基因解碼表明，對(duì)于其他多聚谷氨酰胺疾病（如SCA3、SCA6、脊髓小腦萎縮１型（SCA1)7和DRPLA），純合子患者通常比雜合子患者早發(fā)病且癥狀更為嚴(yán)重。在亨廷頓病中，罕見(jiàn)的純合子患者的發(fā)病年齡與雜合子相似，但其疾病進(jìn)展可能更快。此外，在SCA2和SCA6中，中等大小的純合等位基因也與疾病相關(guān)。

然而，也有少數(shù)基因檢測(cè)顯示存在雙等位基因脊髓小腦萎縮１型（SCA1)擴(kuò)增的患者，但這些結(jié)果并不支持這些患者的表型更為嚴(yán)重。佳學(xué)基因解碼基因檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于提供了更為豐富的臨床證據(jù)和更詳細(xì)的分子特征分析，包括對(duì)39–44個(gè)重復(fù)等位基因中CAT三核苷酸中斷的檢測(cè)，如果存在，則可能對(duì)應(yīng)于正常等位基因。因此，之前報(bào)道的五名具有雙等位基因脊髓小腦萎縮１型（SCA1)擴(kuò)增的患者中，至少有兩名可能并不攜帶兩個(gè)致病等位基因，而是只有一個(gè)致病等位基因和一個(gè)正常中斷等位基因。

與許多多聚谷氨酰胺疾病一樣，脊髓小腦萎縮１型（SCA1)的發(fā)病年齡與致病性擴(kuò)增的大小呈負(fù)相關(guān)，更具體地說(shuō)，較長(zhǎng)的不間斷CAG擴(kuò)展與發(fā)病年齡呈負(fù)相關(guān)。我們患者的疾病進(jìn)展非常迅速，這可能與致病性擴(kuò)增的大小有關(guān)，因?yàn)樗cSARA評(píng)分的快速惡化存在關(guān)聯(lián)。此外，有研究表明，嬰兒或青少年期發(fā)病的脊髓小腦萎縮１型（SCA1)病例往往病情嚴(yán)重且進(jìn)展迅速。

在一項(xiàng)大型歐洲研究中，317名來(lái)自EUROSCA登記處的脊髓小腦萎縮１型（SCA1)患者的數(shù)據(jù)顯示，致病等位基因中的三聯(lián)體重復(fù)數(shù)量與較低的發(fā)病年齡相關(guān)。然而，基因解碼基因檢測(cè)也發(fā)現(xiàn)，脊髓小腦萎縮１型（SCA1)患者中非致病等位基因的三聯(lián)體數(shù)量與較低發(fā)病年齡呈負(fù)相關(guān)。但是在病例中，我們無(wú)法無(wú)法排除其他遺傳因素或潛在環(huán)境因素對(duì)患者病程的影響。例如，最近的一項(xiàng)基因解碼指出，CAG重復(fù)的體細(xì)胞不穩(wěn)定性與脊髓小腦萎縮１型（SCA1)患者的臨床進(jìn)展相關(guān)。同時(shí)，ATXN1基因中缺乏CAT中斷的中等大小等位基因具有可變性，且顯示出體細(xì)胞不穩(wěn)定性。因此，本案例中患者的兩個(gè)等位基因的體細(xì)胞不穩(wěn)定性可能與疾病的發(fā)病年齡、進(jìn)展速度或癥狀嚴(yán)重程度有關(guān)。進(jìn)一步的來(lái)自其他學(xué)科的分析有助于確認(rèn)或反駁本案例的基因檢測(cè)結(jié)果及分析。

總之，北京脊髓小腦萎縮基因檢測(cè)分享了一例罕見(jiàn)病例，該病例攜帶一個(gè)61個(gè)CAG的全滲透等位基因和一個(gè)37個(gè)不間斷CAG重復(fù)的中間等位基因，且患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的臨床癥狀。確定不存在CAT中斷為該家族的疾病預(yù)測(cè)和遺傳咨詢提供了重要信息。

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